如何设计 Twist 用于 PCR 扩增的恒定侧翼?

请考虑引物设计的标准规则:

  1. 20-25 bp 的长度
  2. G/C 内容的 35-70%
  3. 熔化温度(Tm)为 55-60°C
  4. 引物对的 Tm 值应相差 5°C 以内
  5. 引物对不应有互补区
  6. 避免可变区中的内部引物结合位点

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