¿Cómo debo diseñar los flancos constantes que Twist utilizará para la amplificación por PCR?
Tenga en cuenta las reglas estándar para el diseño de cebadores:
- Longitud de 20-25 pb
- 35-70 % de contenido de G/C
- Temperatura de fusión (Tm) de 55-60 °C
- Los pares de cebadores deben tener una Tm con una diferencia de 5 °C entre sí
- Los pares de cebadores no deben tener regiones complementarias
- Evitar sitios internos de unión del cebador en la región variable
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