¿Cómo debo diseñar los flancos constantes que Twist utilizará para la amplificación por PCR?

Tenga en cuenta las reglas estándar para el diseño de cebadores:

  1. Longitud de 20-25 pb
  2. 35-70 % de contenido de G/C
  3. Temperatura de fusión (Tm) de 55-60 °C
  4. Los pares de cebadores deben tener una Tm con una diferencia de 5 °C entre sí
  5. Los pares de cebadores no deben tener regiones complementarias
  6. Evitar sitios internos de unión del cebador en la región variable

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