游离 DNA 是在高特异性的生物过程中生成的，该过程可产生特征性的片段长度曲线。因此，我们建议制备一个任何方式都无法改变大小配置文件的文库：使用“Twist 机械片段化文库制备试剂盒”，不进行任何额外的片段化处理。使用这种方法时，文库插入大小非常完美。我们在 cfDNA 样本上广泛使用了 Twist UMI 接头，它们非常适用于双链共识序列，并且在评估突变率方面发挥重要作用。