您可以借助以下方法，使用接头克隆基因片段：

酶切/连接——将限制性位点置于 Twist 接头内，以便克隆

IIS 型或 Golden Gate——将限制性位点置于 Twist 接头内部，以便于进行 TOPO 克隆（平端），接头序列也将被克隆进去

Gateway 克隆——在您的序列两端增加 attB 位点

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