我们使用专有的基于同源性的克隆方法来组装我们的克隆基因，因此限制位点对克隆并不重要，您在设计插入片段时也不需要考虑 Twist 的克隆设计。但如果您的插入位点位于两个限制性位点之间，请将这些位点作为载体骨架的一部分，以确保框架具备位点特性。

有两种使用限制性内切酶克隆的选择。

选择 1 - 在插入片段上加入限制性位点

包括插入序列两端的整个限制性内切酶位点。限制性内切酶位点将是计算机中插入片段的一部分。

当订购基因时，您必须在插入片段上加入限制性内切酶位点。在定制载体存储方案中，如果您在订单中排除了基因上的限制性内切酶位点，那么您的最终产品中将完全没有限制性内切酶位点。

选择 2 - 在载体上加入限制性位点

请勿在插入序列中包含限制性内切酶位点。在定制载体存储表的“载体 + 插入”框中加入每个完整的限制性内切酶位点。限制性内切酶位点将是计算机中载体的一部分。

当订购基因时，请勿在插入片段上加入限制性内切酶位点。在定制载体存储方案中，如果您在订单中添加了基因上的限制性内切酶位点，那么您的最终产品中将重复出现限制性内切酶位点。