イオンチャネル scFv ライブラリ

Twist イオンチャネル scFv ライブラリは、クモ、ヘビ、サソリ、イソギンチャクの天然ペプチド毒素のループ配列を、多様なヒト scFv 抗体ライブラリである Twist GPCR 2.0 scFv ライブラリの HCDR3 に移植した合成ファージディスプレイライブラリです。そのため、このライブラリにより、ペプチド神経毒のイオンチャネル標的への結合を模倣することができます。２種類の重鎖（VH1-69、VH3-30）および４種類の軽鎖（VK1-39、VL1-51、VL2-14、VK3-15）に導入されると、それらの組み合わせの結果、1 × 10⁹ の多様性を有する完全ヒト scFv ファージディスプレイライブラリが生成されます。

Twist は二つの型式のイオンチャンネル scFv ライブラリをご提供しています。一つは、分子内ジスルフィド結合を形成して構造を固定できるシステインペアを持つもの（Cys+ ライブラリ）、もう一つはそうしたシステインペアを持たないもの（Cys- ライブラリ）です。Cys+ ライブラリは、HCDR3 ループの N 末端および C 末端にシステイン残基を組み込んだものです。いずれの型式もイオンチャネル scFv ライブラリの一つとして提供され、目的の標的に対して並行してパニングすることができます。

Cys+ ライブラリ、Cys- ライブラリはそれぞれ 2,219 種類のループ配列（長さ：11 ～ 78 個のアミノ酸）、1,852 種類のループ配列（長さ：9 ～ 66 個のアミノ酸）に由来する多様な CDR3 に特徴があります。各 CDR3 ループの側面には柔軟な GSG リンカーが位置しており、対になっていない C-グリコシル化部位、N-グリコシル化部位は取り除かれています。

10 ～ 12 週間でパニングから機能アッセイまで実施できます。

このプロセスは、多様な Twist イオンチャネル scFv ライブラリを標的抗原に対してファージスクリーニングすることから始まり、候補の抗体断片を完全長 IgG に再構成して終了します。

また、イオンチャンネル scFv ライブラリのライセンスを取得して、貴社内で探索プロジェクトを開始することも可能です。詳細につきましては、biopharma@twistbioscience.com までお問い合わせください。

Twist イオンチャネル scFv ライブラリを用いて複数回膜貫通型受容体である APJR に対してパニングすることで、この心血管系標的に結合する複数のユニーククローンを同定することに成功しました。フローサイトメトリーにより、SC-44-139 のような抗体が APJR 陽性細胞に高い親和性で結合することが示されています。