Comment concevoir les régions flanquantes constantes que Twist utilisera pour l’amplification par PCR ?
Tenir compte des règles standard pour la conception des amorces :
- Longueur de 20 à 25 pb
- Teneur en G/C de 35 à 70 %
- Température de fusion (Tf) de 55-60 °C
- Les paires d’amorces doivent avoir une Tf à moins de 5 °C l’une de l’autre
- Les paires d’amorces ne doivent pas comporter de régions complémentaires
- Éviter les sites de liaison d’amorces internes dans la région variable
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