¿Cuáles son los requisitos para mi vector personalizado?

Asegúrese de que su vector cumpla con los requisitos siguientes:

  • Volumen vectorial ≥ 100 ul (el material plasmídico no se puede enviar en papel de filtro)
  • Concentración de vector ≥ 100 ng/ul
  • Masa del vector 10 ug
  • Debe tener un origen de replicación bacteriano (no en un número de copias bajo)
  • Debe ser población clonal
  • Debe ser circular
  • Debe tener un marcador de resistencia a antibióticos
  • No debe contener homopolímeros/secuencia repetitiva > 9 pb dentro de los 40 pb del sitio de inserción
  • Repeticiones: debe contener al menos 40 pb de secuencia única sin repeticiones directas o invertidas > 19 pb antes y después del sitio de inserción
  • No debe contener ccdB en el producto genético final
  • Debe poder linealizar por el sitio de la enzima de restricción dentro de los 50 pb del sitio de inserción
  • Debe ser compatible con BSL-1

Resistencia a antibióticos:

El plásmido debe contener uno de los siguientes marcadores de resistencia a antibióticos para la E. coli. Las concentraciones estándar están a continuación:

Antibiótico  

Concentración estándar disponible en producción (ug/ml)

Kan

50

AMP

100

CHLOR

25

APRA

50

SPEC

100

TET

10

ZEO

50

BLAST

100

Líneas celulares (E. coli)       

  • Línea celular disponible en producción        
  • Cepa de clonación similar a DH10Beta   
  • Cepa similar a Stbl3 (se puede cultivar a 37 ℃)        

Número de copias              

Solo se permiten los orígenes de replicación constitutivos.

Definición de Twist

Aceptado

Ejemplo

Alto

ColE1/pMB1/pBR322/pUC

Medio

Sí, rendimiento de minipreparación reducido

p15A

Bajo

No

pSC101

Condiciones de crecimiento     

  • Temperatura estándar: 37 ℃/30 ℃   
  • Tiempo estándar: Noche/24 horas         
  • Las colonias en placa deben alcanzar un tamaño compatible con la automatización después de 16 horas/24 horas de crecimiento en LB-Lennox.

¿Le resultó útil este artículo?

No

¿Aún tiene preguntas? Contáctese con nosotros

Powered by Translations.com GlobalLink Web Software