Soluciones de terapia celular

Introducción

La terapia celular adoptiva (ACT) ha permitido tratamientos contra el cáncer muy efectivos para pacientes con muy pocas opciones de tratamiento. Utiliza el propio sistema inmunológico del paciente para atacar a las células cancerígenas. 

La terapia de TCR por ingeniería es un tipo de ACT que aprovecha los receptores de los linfocitos T diseñados dirigidos a antígenos tumorales específicos. Esto empieza con una secuenciación de la biopsia tumoral para identificar mutaciones tumorales y, normalmente, la sangre periférica para detectar el repertorio de TCR. 

La secuenciación del repertorio de TCR puede realizarse mediante la secuenciación de una sola célula o la secuenciación masiva. Cada una tiene sus propias ventajas. La secuenciación masiva le permite muestrear más del espacio de la secuencia, pero se pierde la información sobre el emparejamiento de CTR alfa-beta. La secuenciación monocelular le permite capturar información sobre el emparejamiento de la cadena alfa-beta y la composición del receptor. Sin embargo, la secuenciación monocelular presenta un rendimiento mucho menor que la secuenciación masiva.  

¿Cómo puede ayudarme Twist a crear bibliotecas de TCR?

Twist ofrece bibliotecas de TCR que complementan ambas estrategias:

Biblioteca de TCR agrupados emparejados (figura 1A)

• Le permite retener el emparejamiento de cadenas alfa-beta originales para maximizar la validación de aciertos y replicar el repertorio de TCR.
• Este es un buen complemento para la secuenciación monocelular, en la que se conoce el emparejamiento de TCR alfa-beta.

Biblioteca combinatoria de TCR (figura 1B)

• Permite mezclar pares de cadenas alfa y beta para crear una diversidad adicional y explorar nuevas combinaciones más allá del repertorio identificado.
• Este es un buen complemento para la secuenciación masiva, en la que se conoce el emparejamiento de TCR alfa-beta. 
   

Datos de rendimiento

El descubrimiento de TCR se debe al cribado de repertorios de células inmunitarias y la resintetización de grandes números de posibles ligantes. Las bibliotecas de TCR pueden aprovecharse para generar en poco tiempo combinaciones de cadenas alfa y beta de TCR para un cribado de alto rendimiento. Con las bibliotecas combinatorias de TCR, las cadenas alfa y beta se agrupan para crear una biblioteca de mayor diversidad que permita integrar el espacio de las variantes más allá del repertorio identificado. Mediante las bibliotecas de TCR agrupados emparejados, se conserva el emparejamiento explícito de cadenas alfa y beta identificado mediante secuenciación. 

Bibliotecas combinatorias de TCR

Bibliotecas de TCR agrupados emparejados

Flujo de trabajo de descubrimiento de receptores de linfocitos T (TCR) 

Asóciese con Twist Bioscience para identificar y desarrollar nuevas terapias celulares avanzadas mediante bibliotecas de receptores de linfocitos T (TCR) de alta diversidad y a gran escala.

Le proporcionaremos bibliotecas de cribado de alta uniformidad que son combinaciones precisas de fragmentos de genes definidas por el usuario, y que le permitirán probar con eficiencia el cribado exhaustivo de las combinaciones deseadas.

Introducción

Durante los últimos años, la terapia de linfocitos T de receptores de antígenos quiméricos (CAR) ha surgido como una nueva forma de inmunoterapia. Los nuevos diseños de CAR junto con los avances en la tecnología de transferencia génica y la edición de genes ha abierto la puerta a nuevas terapias contra el cáncer. Sin embargo, todavía hay muchos retos que deben abordarse para acelerar el desarrollo.  

Los CAR están formados por un dominio de unión extracelular, una región bisagra, un dominio transmembrana y uno o más dominios intracelulares. El ajuste fino de cada dominio del CAR es uno de los pasos iniciales a la hora de mejorar la especificidad de los linfocitos T, el reconocimiento de antígenos y la función de los linfocitos T. Los estudios han demostrado que pequeñas modificaciones en el CAR pueden tener un impacto significativo en los resultados terapéuticos. Por lo tanto, resulta clave disponer de una biblioteca completa para interrogar, ya que todas las construcciones CAR necesitan pruebas intensivas. 

Twist ha desarrollado una tecnología para crear bibliotecas de CAR de forma que se mezclen sin problemas variantes de cada dominio por el proceso de ensamblaje sin trazas. 

¿Cómo funciona?

Figura1: Cada uno de estos dominios puede estar formado por múltiples variantes de secuencias diferentes. Estos dominios se sintetizan como genes que Twist combina en un proceso de ensamblaje sin trazas con el fin de generar una biblioteca muy diversa para la optimización de la estructura. Esta tecnología permite el descubrimiento de combinaciones únicas de dominios que revelan funcionalidades nuevas.

Flujo de trabajo de descubrimiento y optimización de receptores de antígenos quiméricos (CAR)

Cada dominio de la estructura CAR influye en la funcionalidad de los CAR de forma independiente y sinérgica. Las bibliotecas de CAR sirven como una herramienta para ajustar de manera precisa los módulos con el fin de desvelar codependencias y comprender mejor el impacto de la especificidad de los linfocitos T, el reconocimiento de antígenos y la función de los linfocitos T.

Asóciese con Twist en cualquier fase de su flujo de trabajo de descubrimiento. 

• Aproveche los flujos de trabajo in vivo e in vitro para unir el descubrimiento y la optimización.
• Aproveche nuestras bibliotecas sintéticas para la optimización y la validación de las estructuras.

Rellene nuestro formulario de envío de la biblioteca y envíelo library@twistbioscience.com para la revisión del diseño. Una vez finalizada la revisión del diseño, le proporcionaremos un presupuesto. El precio y el plazo de entrega de las bibliotecas combinatorias de ensamblaje variarán por proyecto.